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鼻病毒PCR檢測試劑盒價格上海聯祖生物相關產品:AFP-L2檢測試劑盒與二氧化碳反應的物質要密封保存,其相應的溶液較固體更易反應,所以更要注意密封保存。
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1、酶標板:一塊(96孔)
2、 標準品(凍干品): 2瓶,請臨用前15分鐘內配制。每瓶以樣品稀釋液稀釋至0.5ml,蓋好后室溫靜置大約10分鐘,同時反復顛倒/搓動以助溶解,其濃度為200 U/L,然后做系列倍比稀釋(注:不要直接在板中進行倍比稀釋),分別配制成200 U/L,100 U/L,50 U/L,25 U/L,12.5 U/L,6.25 U/L,3.12 U/L,樣品稀釋液直接作為空白孔 0 U/L。如配制100 U/L標準品:取0.3ml (不要少于0.3ml )200 U/L的上述標準品加入含有0.3ml樣品稀釋液的Eppendorf管中,混勻即可,其余濃度以此類推。
3、 樣品稀釋液:1×20ml。
4、 檢測稀釋液A:1×10ml。
5、 檢測稀釋液B:1×10ml。
注意事項:1.基礎程序;2.擴增溫度和延伸溫度;3.反應時間;4.循環(huán)次數;5.PCR 反應液的配制;6.PCR技術的基本原理;7.PCR的反應動力學;8.PCR擴增產物;9.PCR反應體系與反應條件。
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產品名稱 | 鼻病毒PCR檢測試劑盒價格 |
規(guī)格 | 50T |
貨號 | LZP7501 |
實驗過程:
一、試劑準備
1. DNA模板
2.對應目的基因的特異引物(在PCR反應中,新合成的DNA是要接在一小段序列上才能繼續(xù)按照模板DNA復制,而不能從無到有,憑空合成。這一小段序列就是你所要有設計的引物。可以是DNA也可以是RNA,一般20多bp,需要根據你的模板鏈設計。因此,擴增不同的基因需要設計不同的引物)
3.10×PCR Buffer
4.2mM dNTPmix:含dATP、dCTP、dGTP、dTTP各2mM
5.Taq酶
二、操作步驟
1.在冰浴中,按以下次序將各成分加入一無菌0.5ml離心管中。
10×PCR buffer 5μl
dNTP mixl 4μl
引物1(10pM) 2μl
引物2(10PM) 2μl
Taq酶(2U/μl) 1μl
DNA模板(50ng-1μg/μl) 1 μl
加ddH2O至 50 μl
視PCR儀有無熱蓋,不加或添加石蠟油。
2.調整好反應程序。將上述混合液稍加離心,立即置PCR儀上,執(zhí)行擴增。一般:在93℃預變性3-5min,進入循環(huán)擴增階段:93℃ 40s → 58℃ 30s → 72℃ 60s,循環(huán)30-35次,zui后在72℃ 保溫7min。
3.結束反應,PCR產物放置于4℃待電泳檢測或-20℃長期保存。
4.PCR的電泳檢測:如在反應管中加有石蠟油,需用100μlLuFang進行抽提反應混合液,以除去石蠟油;否則,直接取5-10μl電泳檢測。
三、注意事項
1.PCR反應應該在一個沒有DNA污染的干凈環(huán)境中進行設立一個的PCR實驗室。
2.純化模板所選用的方法對污染的風險有極大影響。一般而言,只要能夠得到可靠的結果,純化的方法越簡單越好。
3.所有試劑都應該沒有核酸和核酸酶的污染。操作過程中均應戴手套。
4.PCR試劑配制應使用zui高質量的新鮮雙蒸水,采用0.22μm濾膜過濾除菌或高壓滅菌。
5.試劑都應該以大體積配制,試驗一下是否滿意,然后分裝成僅夠一次使用的量儲存,從而確保實驗與實驗之間的連續(xù)性。
6.試劑或樣品準備過程中都要使用一次性滅菌的塑料瓶和管子,玻璃器皿應洗滌干凈并高壓滅菌。
7.PCR的樣品應在冰浴上化開,并且要充分混勻。檢測步驟:
一、 試劑的準備
從試劑盒中取出熒光PCR反應液(BC-qPCR MIX)、酶混合物(Enzymes MIX),冰上融化并振蕩混勻后,10000rpm離心10s。
設所需要的PCR反應管管數為N(N=樣本數+1管陰性對照+1管陽性對照),每個測試反應體系配制如下表:
試劑 每個反應加入的量 N個反應加入的量
熒光PCR反應液 14µL N×14µL
酶混合物 1 µL N×1 µL
總量 15 µL N×15µL
(1) 計算好各試劑的使用量,加入一適當體積潔凈離心管中,充分混勻,10000rpm離心10s,向設定的N個PCR反應管中分別加入15μL熒光PCR反應液,向每管中加入處理后樣品或陰性對照(NTC)和陽性對照(BC-PTC)5μL,10000rpm瞬時離心10秒。
7.2 qPCR反應條件
將各反應管放入定量PCR儀器的反應槽內。
推薦循環(huán)條件:
1循環(huán) 50℃ for 2 min
預變性 1循環(huán) 95℃ for 10 min
PCR擴增 40循環(huán) 95℃ for 15 sec
60℃ for 60 sec
在60℃延伸時收集熒光信號。報告基團:設置為FAM。淬滅基團:NONE,請勿選擇ROX參比熒光。
Lead chlorideβ-D-葡萄糖五乙酸酯 98%2,6-二羥基喹啉 90%
Manganese chlorideD-半乳糖烯 95%乙鈉 96%
Silver chlorideD-葡糖酸-γ-內酯酮化合物 98%乙鈉 20% w/w乙溶液
Strontium chloride hexahydrateD-葡萄烯糖 96%甲鈉 97%
Rubidium chlorideβ-D-半乳糖五乙酸酯 98%甲鈉溶液 30 wt%甲溶液
Ruthenium(III) chloride5,6-O-異叉基-L-抗壞血酸 97%檸檬酸鉍銨 99%
Ruodium (Ⅲ) Chloride Hydrate乳糖酸 97%硫酸鉍 AR,99%
Cerous chloride1,2-O-異亞基-D-呋喃葡萄糖 98%硫化亞銅 85-90%,工業(yè)級
Lanthanum chloride heptahydrateα-甲基-D-甘露糖苷 99%氧化亞銅 AR,95.0%
Neodymium(III) chlorideL-核糖 98%硫化銅 AR,99.0%
Hematin三-O-乙酰-D-半乳糖烯 97%亞碲酸 99.5%
Ethylene glycol三-O-乙酰基-D-葡萄烯糖 98%亞碲酸鈉 97%
PVAL-蘇糖酸鈣 98% AR,98%
PVB乙酰溴-α-D-葡萄糖 包含 1% CaCO3 穩(wěn)定劑, 98%0.99
1,3-Propanediol2-丁酮 for HPLC, ≥99.7% 分析標準品,≥99.7%
1,3-Butanediol鄰二氯苯 for HPLC,99%2-乙酰基-3-甲基吡 98%
1,1-二氯乙烷(分析標準品,用于環(huán)境分析,≥99.7%(GC))Histone H2A (L88A6) Mouse mAbMAGEA12 黑色素瘤相關抗原12抗體
2,4-二硝苯標準溶液(1000μg/ml,溶劑:甲)CD14 (61D3) Mouse mAb (APC Conjugate)MAGEA11 黑色素瘤相關抗原11抗體
2,4-二硝苯標準溶液(1.00mg/ml,基體:甲)Histone H3 (96C10) Mouse mAbMAGEA11 黑色素瘤相關抗原11抗體
2,4-二硝苯(分析標準品,用于環(huán)境分析)Histone H3 (96C10) Mouse mAbMAGEA10 黑色素瘤相關抗原10抗體
鄰苯二甲酸二異癸酯(標準品)PRC1 AntibodyMAGE-1 黑色素瘤相關抗原抗體
2,4-二胺(標準品)Synaptophysin (D8F6H) XP® Rabbit mAbMAG-a/L-MAG 髓鞘相關糖蛋白-a抗體
2,2-二甲基丁烷(分析標準品,>99.5%(GC))Synaptophysin (D8F6H) XP® Rabbit mAbMAG-a/b 髓鞘相關糖蛋白a/b抗體
2,3-二甲基丁烷(分析標準品,≥99.9%(GC))tch Isoform Antibody Sampler KitMAG1 肺癌轉移相關蛋白抗體
3,4-二氯甲苯(分析標準品,用于環(huán)境分析)Helios (D4Z6D) Rabbit mAbMAFbx/Fbx32 泛素蛋白連接酶抗體
2,6-二氯芐基氯(標準品)Phospho-Histone H3 (Ser10) (D2C8) XP® Rabbit mAb (Biotinylated)Mafa v-maf 肌腱膜纖維肉瘤癌基因同源物A抗體
鼻病毒PCR檢測試劑盒價格22號染色體開放閱讀框36抗體5-Acetyl-2-(1-hydroxy-1-methylethyl)benzofuran中文名:別名:分子式:C13H14O3
22號染色體開放閱讀框9抗體Myrciaphene A中文名:別名:分子式:C14H18O9
腫瘤高表達細胞周期相關蛋白抗體1-(3-(1-Hydroxy-3-methylbutyl)-4-methoxyphenyl)ethan-1-one中文名:別名:分子式:C14H20O3
9號染色體開放閱讀框117抗體3,5-Dihydroxy-1,7-bis(3,4-dihydroxyphenyl)heptane中文名:別名:分子式:C19H24O6
6號染色體開放閱讀框120抗體5-Acetyl-6-hydroxy-2-(1-hydroxy-1-methylethyl)benzofuran中文名:別名:分子式:C13H14O4