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轉移酶同源蛋白1抗體8α-Hydroxylabda-13(16),14-dien-19-yl p-hydroxycinnamate中文名:別名:分子式:C29H40O4乙肝病毒衣殼蛋白抗體Methyl dodonate A acetate中文名:別名:分子式:C23H30O5丙型肝炎病毒1a基因型NS5蛋白
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注意事項:1.基礎程序;2.擴增溫度和延伸溫度;3.反應時間;4.循環次數;5.PCR 反應液的配制;6.PCR技術的基本原理;7.PCR的反應動力學;8.PCR擴增產物;9.PCR反應體系與反應條件。
產品名稱 | 豬藍耳病病毒PCR檢測試劑盒價格 |
規格 | 50T |
貨號 | LZP7901 |
實驗過程:
一、試劑準備
1. DNA模板
2.對應目的基因的特異引物(在PCR反應中,新合成的DNA是要接在一小段序列上才能繼續按照模板DNA復制,而不能從無到有,憑空合成。這一小段序列就是你所要有設計的引物。可以是DNA也可以是RNA,一般20多bp,需要根據你的模板鏈設計。因此,擴增不同的基因需要設計不同的引物)
3.10×PCR Buffer
4.2mM dNTPmix:含dATP、dCTP、dGTP、dTTP各2mM
5.Taq酶
二、操作步驟
1.在冰浴中,按以下次序將各成分加入一無菌0.5ml離心管中。
10×PCR buffer 5μl
dNTP mixl 4μl
引物1(10pM) 2μl
引物2(10PM) 2μl
Taq酶(2U/μl) 1μl
DNA模板(50ng-1μg/μl) 1 μl
加ddH2O至 50 μl
視PCR儀有無熱蓋,不加或添加石蠟油。
2.調整好反應程序。將上述混合液稍加離心,立即置PCR儀上,執行擴增。一般:在93℃預變性3-5min,進入循環擴增階段:93℃ 40s → 58℃ 30s → 72℃ 60s,循環30-35次,zui后在72℃ 保溫7min。
3.結束反應,PCR產物放置于4℃待電泳檢測或-20℃長期保存。
4.PCR的電泳檢測:如在反應管中加有石蠟油,需用100μlLuFang進行抽提反應混合液,以除去石蠟油;否則,直接取5-10μl電泳檢測。
三、注意事項
1.PCR反應應該在一個沒有DNA污染的干凈環境中進行設立一個的PCR實驗室。
2.純化模板所選用的方法對污染的風險有極大影響。一般而言,只要能夠得到可靠的結果,純化的方法越簡單越好。
3.所有試劑都應該沒有核酸和核酸酶的污染。操作過程中均應戴手套。
4.PCR試劑配制應使用zui高質量的新鮮雙蒸水,采用0.22μm濾膜過濾除菌或高壓滅菌。
5.試劑都應該以大體積配制,試驗一下是否滿意,然后分裝成僅夠一次使用的量儲存,從而確保實驗與實驗之間的連續性。
6.試劑或樣品準備過程中都要使用一次性滅菌的塑料瓶和管子,玻璃器皿應洗滌干凈并高壓滅菌。
7.PCR的樣品應在冰浴上化開,并且要充分混勻。檢測步驟:
一、 試劑的準備
從試劑盒中取出熒光PCR反應液(BC-qPCR MIX)、酶混合物(Enzymes MIX),冰上融化并振蕩混勻后,10000rpm離心10s。
設所需要的PCR反應管管數為N(N=樣本數+1管陰性對照+1管陽性對照),每個測試反應體系配制如下表:
試劑 每個反應加入的量 N個反應加入的量
熒光PCR反應液 14µL N×14µL
酶混合物 1 µL N×1 µL
總量 15 µL N×15µL
(1) 計算好各試劑的使用量,加入一適當體積潔凈離心管中,充分混勻,10000rpm離心10s,向設定的N個PCR反應管中分別加入15μL熒光PCR反應液,向每管中加入處理后樣品或陰性對照(NTC)和陽性對照(BC-PTC)5μL,10000rpm瞬時離心10秒。
7.2 qPCR反應條件
將各反應管放入定量PCR儀器的反應槽內。
推薦循環條件:
1循環 50℃ for 2 min
預變性 1循環 95℃ for 10 min
PCR擴增 40循環 95℃ for 15 sec
60℃ for 60 sec
在60℃延伸時收集熒光信號。報告基團:設置為FAM。淬滅基團:NONE,請勿選擇ROX參比熒光。
組成及試劑配制:
1、酶標板:一塊(96孔)
2、 標準品(凍干品): 2瓶,請臨用前15分鐘內配制。每瓶以樣品稀釋液稀釋至0.5ml,蓋好后室溫靜置大約10分鐘,同時反復顛倒/搓動以助溶解,其濃度為200 U/L,然后做系列倍比稀釋(注:不要直接在板中進行倍比稀釋),分別配制成200 U/L,100 U/L,50 U/L,25 U/L,12.5 U/L,6.25 U/L,3.12 U/L,樣品稀釋液直接作為空白孔 0 U/L。如配制100 U/L標準品:取0.3ml (不要少于0.3ml )200 U/L的上述標準品加入含有0.3ml樣品稀釋液的Eppendorf管中,混勻即可,其余濃度以此類推。
3、 樣品稀釋液:1×20ml。
4、 檢測稀釋液A:1×10ml。
5、 檢測稀釋液B:1×10ml。
NAM [=N-(9-吖啶基)馬來酰亞](>98.0%(HPLC))TCF8/ZEB1 (D80D3) Rabbit mAb十二烷基磺酸
2,萘二(>99.0%(GC))SHP-2 (D50F2) Rabbit mAb硝酸異辛酯
DBD-F [=(N,N-二甲氨基磺酰)-7-氟-2,1,并惡二唑](>98.0%(HPLC))SHP-2 (D50F2) Rabbit mAb氮雜吲唑
N-(1-芘基)馬來酰亞(>97.0%(HPLC))Phospho-eIF2α (Ser51) (D9G8) XP® Rabbit mAb2,1,并噻二唑
愛維莫潘Phospho-eIF2α (Ser51) (D9G8) XP® Rabbit mAb二基硫代酰鹽酸鹽
磺炳基十四烷基二甲甜菜Phospho-M-CSF Receptor (Tyr699) Antibody1-氧基-1-*硅氧基環烷
磺炳基十六烷基二甲甜菜GFAP (E6N9L) Mouse mAb2-吡-羧酸
聚氧月桂(Brij-35);Brij™ L23Myc-Tag (9B11) Mouse mAb (Sepharose® Bead Conjuga)(三氟甲基)
十二烷基硫酸鋰Phospho-DARPP-32 (Ser97) (D11A5) Rabbit mAb3,5-二甲
諾納德® P-40Myosin Va Antibody2-甲氧基-氨基甲酸甲酯
硫代甜菜 8Myosin IIa Antibody駢三氮唑 99.8%
硫代甜菜 10Myosin IIa Antibody1-氨基-1-環己酸
硫代甜菜 12Myosin IIb Antibody1-芐基哌
恩他卡朋;COMT抑制劑PI3 Kinase p110 δ (D1Q7R) Rabbit mAb基*氧基硅烷
曲拉通X-114Myosin IIc Antibody5-溴-2-酚
曲拉通X-405Myosin IIc Antibody野黃芩苷
異硫酸胍Phospho-M-CSF Receptor (Tyr923) Antibody硫酸氧釩
CHAPS;[(膽酰基)二甲氨基]-1-磺酸IRS-1 (D23G12) Rabbit mAb1,2,3,6-四氫鄰二甲酰亞
基質金屬蛋白酶抑制因子3(TIMP-3)ELISA試劑盒Phospho-RasGRF1 (Ser916) 酸化Ras特異性鳥嘌呤核苷酸釋放因子120 ul
基質金屬蛋白酶抑制因子2(TIMP-2)ELISA試劑盒RAR-Alpha 維甲酸受體-α 10 ug
基質金屬蛋白酶抑制因子1(TIMP-1)ELISA試劑盒RAR Beta 維甲酸受體β100 ul
基質金屬蛋白酶9/明膠酶B(MMP-9/Gelatinase B) ELISA試劑盒RASSF1A Ras相關區域家族1A20 ul
基質金屬蛋白酶8/中性粒細胞膠原酶(MMP-8/Collagenase II)ELISA試劑盒Pan-ras Pan ras100 ul
基質金屬蛋白酶7(MMP-7)ELISA試劑盒RCC1 染色體濃縮調控蛋白1100 ul
基質金屬蛋白酶5(MMP-5)ELISA試劑盒Phospho-RCC1 (Ser11) 酸化染色體濃縮調控蛋白1100 ul
基質金屬蛋白酶4(MMP-4)ELISA試劑盒Rb/RB1 proin 視網膜母細胞瘤相關蛋白1100 ul
基質金屬蛋白酶3(MMP-3)ELISA試劑盒Phospho-Rb (Ser608) 酸化視網膜母細胞瘤相關蛋白1100 ul
豬藍耳病病毒PCR檢測試劑盒價格Hemk甲基轉移酶家族1號蛋白抗體Pterokaurene L3中文名:別名:Pterokaurane L3分子式:C20H30O3
Hemk甲基轉移酶家族2號蛋白抗體14-Deoxy-11,12-didehydroandrographiside中文名:別名:14-Deoxy-11,12-didehydroandrographoside分子式:C26H38O9
HEN1甲基轉移酶同源蛋白1抗體8α-Hydroxylabda-13(16),14-dien-19-yl p-hydroxycinnamate中文名:別名:分子式:C29H40O4
乙肝病毒衣殼蛋白抗體Methyl dodonate A acetate中文名:別名:分子式:C23H30O5
丙型肝炎病毒1a基因型NS5蛋白抗體6α-Hydroxynidorellol中文名:別名:分子式:C20H34O3