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百日咳桿菌(BP)核酸試劑盒價格上海聯祖生物相關產品:靈芝酸 B2(1H)-PYRIDINONE,5-CHLORO-FLUORO-(9CI)去甲勞丹鹽酸鹽,四氫鹽酸鹽西米替汀異夏佛塔苷1-芐基-5-氧-吡咯烷羧酸甲酯氨甲酰甲膽;貝膽2-氨基-6-羥基吡啶
產品分類
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1、酶標板:一塊(96孔)
2、 標準品(凍干品): 2瓶,請臨用前15分鐘內配制。每瓶以樣品稀釋液稀釋至0.5ml,蓋好后室溫靜置大約10分鐘,同時反復顛倒/搓動以助溶解,其濃度為200 U/L,然后做系列倍比稀釋(注:不要直接在板中進行倍比稀釋),分別配制成200 U/L,100 U/L,50 U/L,25 U/L,12.5 U/L,6.25 U/L,3.12 U/L,樣品稀釋液直接作為空白孔 0 U/L。如配制100 U/L標準品:取0.3ml (不要少于0.3ml )200 U/L的上述標準品加入含有0.3ml樣品稀釋液的Eppendorf管中,混勻即可,其余濃度以此類推。
3、 樣品稀釋液:1×20ml。
4、 檢測稀釋液A:1×10ml。
5、 檢測稀釋液B:1×10ml。
注意事項:1.基礎程序;2.擴增溫度和延伸溫度;3.反應時間;4.循環次數;5.PCR 反應液的配制;6.PCR技術的基本原理;7.PCR的反應動力學;8.PCR擴增產物;9.PCR反應體系與反應條件。
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產品名稱 | 百日咳桿菌(BP)核酸試劑盒價格 |
規格 | 48T |
貨號 | LZP8097 |
實驗過程:
一、試劑準備
1. DNA模板
2.對應目的基因的特異引物(在PCR反應中,新合成的DNA是要接在一小段序列上才能繼續按照模板DNA復制,而不能從無到有,憑空合成。這一小段序列就是你所要有設計的引物。可以是DNA也可以是RNA,一般20多bp,需要根據你的模板鏈設計。因此,擴增不同的基因需要設計不同的引物)
3.10×PCR Buffer
4.2mM dNTPmix:含dATP、dCTP、dGTP、dTTP各2mM
5.Taq酶
二、操作步驟
1.在冰浴中,按以下次序將各成分加入一無菌0.5ml離心管中。
10×PCR buffer 5μl
dNTP mixl 4μl
引物1(10pM) 2μl
引物2(10PM) 2μl
Taq酶(2U/μl) 1μl
DNA模板(50ng-1μg/μl) 1 μl
加ddH2O至 50 μl
視PCR儀有無熱蓋,不加或添加石蠟油。
2.調整好反應程序。將上述混合液稍加離心,立即置PCR儀上,執行擴增。一般:在93℃預變性3-5min,進入循環擴增階段:93℃ 40s → 58℃ 30s → 72℃ 60s,循環30-35次,zui后在72℃ 保溫7min。
3.結束反應,PCR產物放置于4℃待電泳檢測或-20℃長期保存。
4.PCR的電泳檢測:如在反應管中加有石蠟油,需用100μlLuFang進行抽提反應混合液,以除去石蠟油;否則,直接取5-10μl電泳檢測。
三、注意事項
1.PCR反應應該在一個沒有DNA污染的干凈環境中進行設立一個的PCR實驗室。
2.純化模板所選用的方法對污染的風險有極大影響。一般而言,只要能夠得到可靠的結果,純化的方法越簡單越好。
3.所有試劑都應該沒有核酸和核酸酶的污染。操作過程中均應戴手套。
4.PCR試劑配制應使用zui高質量的新鮮雙蒸水,采用0.22μm濾膜過濾除菌或高壓滅菌。
5.試劑都應該以大體積配制,試驗一下是否滿意,然后分裝成僅夠一次使用的量儲存,從而確保實驗與實驗之間的連續性。
6.試劑或樣品準備過程中都要使用一次性滅菌的塑料瓶和管子,玻璃器皿應洗滌干凈并高壓滅菌。
7.PCR的樣品應在冰浴上化開,并且要充分混勻。檢測步驟:
一、 試劑的準備
從試劑盒中取出熒光PCR反應液(BC-qPCR MIX)、酶混合物(Enzymes MIX),冰上融化并振蕩混勻后,10000rpm離心10s。
設所需要的PCR反應管管數為N(N=樣本數+1管陰性對照+1管陽性對照),每個測試反應體系配制如下表:
試劑 每個反應加入的量 N個反應加入的量
熒光PCR反應液 14µL N×14µL
酶混合物 1 µL N×1 µL
總量 15 µL N×15µL
(1) 計算好各試劑的使用量,加入一適當體積潔凈離心管中,充分混勻,10000rpm離心10s,向設定的N個PCR反應管中分別加入15μL熒光PCR反應液,向每管中加入處理后樣品或陰性對照(NTC)和陽性對照(BC-PTC)5μL,10000rpm瞬時離心10秒。
7.2 qPCR反應條件
將各反應管放入定量PCR儀器的反應槽內。
推薦循環條件:
1循環 50℃ for 2 min
預變性 1循環 95℃ for 10 min
PCR擴增 40循環 95℃ for 15 sec
60℃ for 60 sec
在60℃延伸時收集熒光信號。報告基團:設置為FAM。淬滅基團:NONE,請勿選擇ROX參比熒光。
千金子二萜二酰甲酰酯(標準品)(二巰基亞甲基)-2-甲基-6-(對二甲氨基基)-4H-吡喃
羌活(標準品)2-甲基
10-羥基癸酸(標準品)三(二亞芐基酮)二鈀
羥基紅花黃色素A(標準品)羥基-2-丁酮
馬兜鈴酸A去甲基代謝產物甲氧基鹽酸鹽
羥基積雪草苷(標準品)2-溴-6-吡啶
羥基積雪草酸(標準品)溴-2-氟甲
羥基積雪草酸5-溴-2-氟甲
海柯皂苷元3,二甲酸
靈芝酸 B2(1H)-PYRIDINONE,5-CHLORO-FLUORO-(9CI)
去甲勞丹鹽酸鹽,四氫鹽酸鹽西米替汀
異夏佛塔苷1-芐基-5-氧-吡咯烷羧酸甲酯
氨甲酰甲膽;貝膽2-氨基-6-羥基吡啶
5-羥甲基糠(標準品)2-芐
茄尼(標準品)甲基二酸
大波斯菊苷,芹菜素-7-O-β-D-吡喃葡萄糖苷(標準品)-甲酸
秦皮苷(標準品)DL-對氟氨酸
秦皮甲素(標準品)二-1,1-二甲基縮溶液
ADP核糖基化樣因子8BCEA /FITC 熒光素標記癌胚抗原IgG100 ul
三酸腺苷酶家族蛋白2CEBP- Alpha /CLEBP Alpha /FITC 熒光素標記轉錄調節因子C/EBP α IgG100 ul
AKIRIN1蛋白Phospho-C/EBPbeta (Ser105) /FITC 熒光素標記兔抗、大、轉錄調節因子C/EBP βIgG100 ul
錨定蛋白樣蛋白1Phospho-C/EBPalpha (Ser21) /FITC 熒光素標記兔抗、大、轉錄調節因子C/EBP α IgG100 ul
腺苷酸激酶2Phospho-C/EBPalpha (Thr222/226) /FITC 熒光素標記兔抗、大、轉錄調節因子C/EBP α IgG20 ul
頂體前體蛋白C/EBP Beta/FITC 熒光素標記轉錄調節因子C/EBP βIgG100 ul
黑色素瘤缺失樣蛋白1Phospho-C/EBPbeta (Thr235) /FITC 熒光素標記兔抗、大、轉錄調節因子C/EBP βIgG100µl
未知糖基化轉移酶AER61PBK/TOPK/FITC 熒光素標記PDZ連接激酶/T-LAK細胞源蛋白激酶IgG100µl
鐵蛋白Fe65Phospho-PBK/TOPK (Thr9) /FITC 熒光素標記酸化PDZ連接激酶/T-LAK細胞源蛋白激酶IgG500µl
百日咳桿菌(BP)核酸試劑盒價格7號染色體開放閱讀框46抗體Astragaloside IV中文名:黃芪甲苷別名:分子式:C41H68O14
NK細胞抑制性受體2DS4抗體Dipsacoside B中文名:川續斷皂苷乙別名:分子式:C53H86O22
1號染色體開放閱讀框147抗體Jujuboside A中文名:酸棗仁皂苷A別名:分子式:C58H94O26
5號染色體開放閱讀框60抗體Pulchineside B4中文名:白頭翁皂苷B4別名:Anemoside B4; Chinensioside A分子式:C59H96O26
CD44V5抗體Momordin Ic中文名:地膚子皂苷Ic別名:分子式:C41H64O13