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免疫熒光技術的實驗步驟:
一、準備好試劑與儀器:
磷酸鹽緩沖鹽水、熒光標記的抗體溶液、緩沖甘油、搪瓷桶三只、有蓋搪瓷盒一只、熒光顯微鏡、玻片架、濾紙、37℃溫箱等。
二、實驗步驟
1.滴加0.01mol/L,pH7.4的PBS于待檢標本片上,十分鐘后棄去,使標本保持一定濕度。
2.滴加適當稀釋的熒光標記的抗體溶液,使其*覆蓋標本,置于有蓋搪瓷盒內,保溫一定時間以三十分鐘為參考。
3.取出玻片,置玻片架上,先用0.01mol/L,pH7.4的PBS沖洗后,再按順序過0.01mol/L,pH7.4的PBS三缸浸泡,每缸三到五分鐘,并不停地搖晃振蕩。
4.取出玻片,用濾紙吸去多余水分,但不使標本干燥,加一滴緩沖甘油,以蓋玻片覆蓋。
5.立即用熒光顯微鏡觀察。觀察標本的特異性熒光強度。
公司抗體僅用于科研現貨供應,質量有保證、*、實驗效果好,同時我司為您提供新價格、說明書、規格、用途、實驗原理等相關操作說明,歡迎前來選購!
英文名稱 Anti-CK10
中文名稱 CK10抗體
別 名 56 kDa cytokeratin; CK 10; ck10; Cytokeratin 10; Cytokeratin 6B; Cytokeratin VIB; Cytokeratin10; k10; Keratin 10; Keratin type i cytoskeletal 10; Keratin type I cytoskeletal 59 kDa; Keratin10; kpp; Krt 1 10; Krt 10 ;KRT10; krt10; Type I keratin Ka10.
濃 度 1mg/1ml
規 格 0.1ml/100μg 0.2ml/200μg
抗體來源 Rabbit
克隆類型 polyclonal
交叉反應 Human, Mouse, Rat, Dog, Pig, Cow, Horse, Rabbit, Guinea Pig
產品類型 一抗
研究領域 腫瘤 細胞周期蛋白
蛋白分子量 predicted molecular weight: 56kDa
性 狀 Lyophilized or Liquid
免 疫 原 KLH conjugated synthetic peptide derived from human CK10
亞 型 IgG
免疫熒光技術的實驗步驟:
一、準備好試劑與儀器:
磷酸鹽緩沖鹽水、熒光標記的抗體溶液、緩沖甘油、搪瓷桶三只、有蓋搪瓷盒一只、熒光顯微鏡、玻片架、濾紙、37℃溫箱等。
二、實驗步驟
1.滴加0.01mol/L,pH7.4的PBS于待檢標本片上,十分鐘后棄去,使標本保持一定濕度。
2.滴加適當稀釋的熒光標記的抗體溶液,使其*覆蓋標本,置于有蓋搪瓷盒內,保溫一定時間以三十分鐘為參考。
3.取出玻片,置玻片架上,先用0.01mol/L,pH7.4的PBS沖洗后,再按順序過0.01mol/L,pH7.4的PBS三缸浸泡,每缸三到五分鐘,并不停地搖晃振蕩。
4.取出玻片,用濾紙吸去多余水分,但不使標本干燥,加一滴緩沖甘油,以蓋玻片覆蓋。
5.立即用熒光顯微鏡觀察。觀察標本的特異性熒光強度。
抗體的制備過程:
1. 免疫原的制備
普通的大分子蛋白,通過分子克隆構建載體并在大腸桿菌中進行誘導表達獲得重組蛋白,純化鑒定后可直接作為免疫原。
小分子蛋白或化合物等分子量小,需要偶聯載體對該分子進行改造才能使其成為具有免疫原性的抗原,常見偶聯載體如BSA、OVA、HAS等。
2. 免疫動物
常用于制備抗血清的動物有豚鼠、家兔、雞、大小鼠等,大量生產時需要用到狗、綿羊、山羊等。
3. 免疫血清的收集
一般家兔、綿羊、山羊可采用靜動脈采血,家兔、豚鼠、大鼠、雞可采用心臟采血,家兔、山羊、綿羊可采用靜脈采血。
4. 免疫血清的純化與鑒定得到的抗血清需要進一步的純化,利用偶聯了抗原的親和柱進行層析,具有高效,特異性強,純度高的特定。接著要鑒定純化蛋白的含量、相對分子的質量、純度以及特異性。
5. 免疫血清的保存建議將抗體分裝后進行保存。抗體一般比較穩定,在-80℃ ~-20 ℃可以保存約5年而不會影響效價,而真空干燥保存時間可以更久。保存前需經除菌并添加防腐劑。
實驗步驟:
① 滴加0.01mol/L,pH7.4的PBS于待檢標本片上,10min后棄去,使標本保持一定濕度。
② 滴加適當稀釋的熒光標記的抗體溶液,使其*覆蓋標本,置于有蓋搪瓷盒內,保溫一定時間(參考:30min)。
③ 取出玻片,置玻片架上,先用0.01mol/L,pH7.4的PBS沖洗后,再按順序過0.01mol/L,pH7.4的PBS三缸浸泡,每缸3-5 min,不時振蕩。
④ 取出玻片,用濾紙吸去多余水分,但不使標本干燥,加一滴緩沖甘油,以蓋玻片覆蓋。
⑤ 立即用熒光顯微鏡觀察。觀察標本的特異性熒光強度,一般可用“+"表示:
(-)無熒光;(±)極弱的可疑熒光;(+)熒光較弱,但清楚可見;(++)熒光明亮;(+++ --++++)熒光閃亮。待檢標本特異性熒光染色強度達“++"以上,而各種對照顯示為(±)或(-),即可判定為陽性。
兔間隙連接蛋白31(CX31)酶聯免疫吸附測定試劑盒 磷二氫鋁黃綠木霉拉丁屬名: Lactobacillus delbrueckii subsp. bulgaricus
兔粒集落激因子受體(GCSFR)酶聯免疫吸附測定試劑盒3-氨-6-溴吡啶德氏乳桿菌保加利亞亞種拉丁屬名: Absidia idahoensis var. thermophilica
兔白介素5(IL-5)酶聯免疫吸附測定試劑盒3-氨-6-溴吡啶喜溫愛達荷犁頭霉拉丁屬名: Wickerhamomyces anomalus
兔蛋白酪氨磷酶受體O(PTPRO)酶聯免疫吸附測定試劑盒3-氨-6-溴吡啶異常威克漢姆酵母拉丁屬名: Geobacillus thermoglucosidasius
兔突觸體相關蛋白25(SAP25)酶聯免疫吸附測定試劑盒4-氨-3-溴吡啶熱葡糖苷地芽孢桿菌拉丁屬名: Saccharomyces cerevisiae
兔生長因子受體結合蛋白14(Grb14)酶聯免疫吸附測定試劑盒4-氨-3-溴吡啶釀酒酵母拉丁屬名: Bacillus indicus
兔抗鈣調素特異抗體(CAM-Ab)酶聯免疫吸附測定試劑盒 3-氨-5-溴吡啶印度芽孢桿菌拉丁屬名: Bacillus subtilis
兔性別決定區Y框蛋白18(SOX18)酶聯免疫吸附測定試劑盒3-氨-5-溴吡啶枯草芽孢桿菌拉丁屬名: Trichoderma asperellum
兔白共同抗原(LCA/CD45)酶聯免疫吸附測定試劑盒溴化鐠(III)棘孢木霉注意事項: 僅用于科學研究或者工業應用等非醫療目的,不可用于類或動物的臨床診斷或治療,非藥用,非食用
兔集聚蛋白(AGRN)酶聯免疫吸附測定試劑盒 溴化釹(III)外皮毛霉拉丁屬名: Saccharomyces cerevisiae
兔白調節素(LR)酶聯免疫吸附測定試劑盒 化銩(III)無水釀酒酵母拉丁屬名: Natrinema altunense
兔肥大類胰蛋白酶(MCT)酶聯免疫吸附測定試劑盒6-三氟吲哚阿爾通山線菌拉丁屬名: Agrobacterium rhizogenes
兔髓鞘型脂肪結合蛋白(FABP8)酶聯免疫吸附測定試劑盒6-三氟吲哚發根土壤桿菌拉丁屬名: Bacillus sp.
兔雷帕霉素靶蛋白(mTOR)酶聯免疫吸附測定試劑盒 2,4-二-5-嘧啶芽孢桿菌屬注意事項: 僅用于科學研究或者工業應用等非醫療目的,不可用于類或動物的臨床診斷或治療,非藥用,非食用
兔葡萄糖轉運蛋白1(GLUT1)酶聯免疫吸附測定試劑盒 2,4-二-5-嘧啶矩圓黑盤孢拉丁屬名: Pseudomonas prosekii
兔紐蛋白(VCL)酶聯免疫吸附測定試劑盒并五苯假單胞菌拉丁屬名: Halomonas aquamarina
CK10抗體兔S100鈣結合蛋白A13(S100A13 )酶聯免疫吸附測定試劑盒HSP-27 ELISA Kit 大鼠熱休克蛋白27
兔視網膜母瘤抑制蛋白(PRB)酶聯免疫吸附測定試劑盒 大鼠Smad1 ELISA Kit 大鼠Smad1
兔生長激素誘導跨膜蛋白(GHITM)酶聯免疫吸附測定試劑盒大鼠Smad7 ELISA Kit 大鼠Smad7
兔孕激素/孕酮(Pg)酶聯免疫吸附測定試劑盒26S PSM ELISA Kit 大鼠26S蛋白酶體
兔胸腺依賴性抗原(TD-Ag)酶聯免疫吸附測定試劑盒TIEG1 ELISA Kit 大鼠TGF-β誘導早期因1
兔黑色素瘤關聯硫酸軟骨素蛋白聚糖(MCSP)酶聯免疫吸附測定試劑盒 visfatin ELISA Kit 大鼠內脂素/內臟脂肪素
兔脂肪酸去飽和酶2 (FADS2)酶聯免疫吸附測定試劑盒TAP ELISA Kit 大鼠胰蛋白酶原激活肽
兔抗神經節苷脂M1抗體(Anti-GM1)酶聯免疫吸附測定試劑盒 CFH ELISA Kit 大鼠補體因子H