樣品準(zhǔn)備：

1）血清-----操作過程中避免任何細(xì)胞刺激。使用不含熱原和內(nèi)毒素的試管。收集血液后，1000×g離心10分鐘將血清和紅細(xì)胞迅速小心地分離。

2）血漿-----EDTA、檸檬酸鹽、肝素血漿可用于檢測(cè)。1000×g離心30分鐘去除顆粒。

3）細(xì)胞上清液---1000×g離心10分鐘去除顆粒和聚合物。

4）組織勻漿-----將組織加入適量生理鹽水搗碎。1000×g離心10分鐘，取上清液

5）保存------如果樣品不立即使用，應(yīng)將其分成小部分-70 ℃保存，避免反復(fù)冷凍。盡可能的不要使用溶血或高血脂血。如果血清中大量顆粒，檢測(cè)前先離心或過濾。不要在37℃或更高的溫度加熱解凍。應(yīng)在室溫下解凍并確保樣品均勻地充分解凍。

服務(wù)：

公司產(chǎn)品僅用于科研我們可以根據(jù)您的應(yīng)用需要，比如在檢測(cè)范圍、種屬以及靈敏度等方面有特殊要求，而量身定制檢測(cè)試劑盒，有效控制檢測(cè)試劑成本。并可提供免費(fèi)代測(cè)。

使用方法：

測(cè)定法的靈敏度來自作為報(bào)告的酶。酶是一種有機(jī)催化劑，很少量的酶即可誘導(dǎo)大量的催化反應(yīng)，產(chǎn)生可供觀察的顯色反應(yīng)現(xiàn)象。因此該體系常被稱為酶放大體系。

1. 標(biāo)準(zhǔn)品的稀釋：本試劑盒提供原倍標(biāo)準(zhǔn)品一支，用戶可按照下列圖表在小試管中進(jìn)行稀釋。   24μg/ml    5號(hào)標(biāo)準(zhǔn)品    150μl的原倍標(biāo)準(zhǔn)品加入150μl標(biāo)準(zhǔn)品稀釋液

12μg/ml    4號(hào)標(biāo)準(zhǔn)品    150μl的5號(hào)標(biāo)準(zhǔn)品加入150μl標(biāo)準(zhǔn)品稀釋液

6μg/ml     3號(hào)標(biāo)準(zhǔn)品    150μl的4號(hào)標(biāo)準(zhǔn)品加入150μl標(biāo)準(zhǔn)品稀釋液

3μg/ml     2號(hào)標(biāo)準(zhǔn)品    150μl的3號(hào)標(biāo)準(zhǔn)品加入150μl標(biāo)準(zhǔn)品稀釋液

1.5μg/ml   1號(hào)標(biāo)準(zhǔn)品    150μl的2號(hào)標(biāo)準(zhǔn)品加入150μl標(biāo)準(zhǔn)品稀釋液

2. 加樣：分別設(shè)空白孔、標(biāo)準(zhǔn)孔、待測(cè)樣品孔。在酶標(biāo)包被板上標(biāo)準(zhǔn)品準(zhǔn)確加樣50μl，待測(cè)樣品孔中先加樣品稀釋液40μl，然后再加待測(cè)樣品10μl。加樣將樣品加于酶標(biāo)板孔底部，盡量不觸及孔壁，輕輕晃動(dòng)混勻。|

3. 溫育：用封板膜封板后置37℃溫育30分鐘。

4. 配液：將30倍濃縮洗滌液用蒸餾水30倍稀釋后備用

5. 洗滌：小心揭掉封板膜，棄去液體，甩干，每孔加滿洗滌液，靜置30秒后棄去，如此重復(fù)5次，拍干。

6. 加酶：每孔加入酶標(biāo)試劑50μl，空白孔除外。

7. 溫育：操作同3。

8. 洗滌：操作同5。

9. 顯色：每孔先加入顯色劑A50μl，再加入顯色劑B50μl，輕輕震蕩混勻，37℃避光顯色15分鐘.

10. 終止：每孔加終止液50μl，終止反應(yīng)（此時(shí)藍(lán)色立轉(zhuǎn)黃色）。

11. 測(cè)定：以空白空調(diào)零，450nm波長(zhǎng)依序測(cè)量各孔的吸光度（OD值）。 測(cè)定應(yīng)在加終止液后15分鐘以內(nèi)進(jìn)行。

注意事項(xiàng):

1．試劑盒從冷藏環(huán)境中取出應(yīng)在室溫平衡15-30分鐘后方可使用，酶標(biāo)包被板開封后如未用完，板條應(yīng)裝入密封袋中保存。

2．濃洗滌液可能會(huì)有結(jié)晶析出，稀釋時(shí)可在水浴中加溫助溶，洗滌時(shí)不影響結(jié)果。

3．各步加樣均應(yīng)使用加樣器，并經(jīng)常校對(duì)其準(zhǔn)確性，以避免試驗(yàn)誤差。一次加樣時(shí)間控制在5分鐘內(nèi)，如標(biāo)本數(shù)量多，推薦使用排槍加樣。

4． 如標(biāo)本中待測(cè)物質(zhì)含量過高（樣本OD值大于標(biāo)準(zhǔn)品孔*孔的OD值），請(qǐng)先將樣本稀釋一定倍數(shù)（n倍）后再測(cè)定，計(jì)算時(shí)請(qǐng)zui后乘以稀釋倍數(shù)（×5×n）。

5． 封板膜只限一次性使用，以避免交叉污染。

6．本試劑不同批號(hào)組分不得混用。顯色劑B請(qǐng)避光保存。

7．嚴(yán)格按照說明書的操作進(jìn)行，試驗(yàn)結(jié)果判定必須以酶標(biāo)儀讀數(shù)為準(zhǔn).

8．所有樣品，洗滌液和各種廢棄物都應(yīng)按傳染物處理。

9. 如與英文說明書有異，以英文說明書為準(zhǔn)。

試劑盒組成及試劑配制 ：

1. 酶聯(lián)板（Assay plate ）：一塊（96孔）。

2. 標(biāo)準(zhǔn)品（Standard）：2瓶（凍干品）。

3. 樣品稀釋液（Sample Diluent）：1×20ml/瓶。

4. 標(biāo)記抗體稀釋液（Biotin-antibody Diluent）：1×10ml/瓶。

5. 辣根過氧化物酶標(biāo)記親和素稀釋液 （HRP-avidin Diluent）：1×10ml/瓶。

6. 標(biāo)記抗體（Biotin-antibody）：1×120μl/瓶（1：100）

7. 辣根過氧化物酶標(biāo)記親和素（HRP-avidin）：1×120μl/瓶（1：100）

8. 底物溶液（TMB Substrate）：1×10ml/瓶。

9. 濃洗滌液（Wash Buffer）：1×20ml/瓶，使用時(shí)每瓶用蒸餾水稀釋25倍。

10. 終止液（Stop Solution）：1×10ml/瓶（2N H2SO4）。

血管活性肽抑制劑(VPI)試劑盒 阿福豆苯乙 CP,98%硬脂鎘 AR

血管活性肽抑制劑(VPI)試劑盒 阿江欖仁苯乙  GR,≥99.0% (GC)硫化亞鐵 Fe,60.0 - 72.0 %

心肌肌凝蛋白輕鏈1(CMLC-1)試劑盒 阿里辛，馬蹄葉，阿立新 異佛爾二 99%硬酯鉛 AR

心肌肌凝蛋白輕鏈1(CMLC-1)試劑盒 ，顛茄乙酰乙烯乙酯 95% Standard for GC

缺血修飾白蛋白(IMA)試劑盒 埃奇烯酰 AR,99.0%化鎳 CP,98.0%

缺血修飾白蛋白(IMA)試劑盒 矮陀陀 A己二二酰肼 98%化鎳 anhydrous, 99.99% metals basis

8-異構(gòu)前列腺素F2α(8-epi-PGF2α)試劑盒矮陀陀酰 A正丁 AR，98.5%苯肼 AR,98.0%

8-異構(gòu)前列腺素F2α(8-epi-PGF2α)試劑盒艾納香素1，4-丁二 99%苦 AR

血管內(nèi)皮鈣粘著蛋白復(fù)合體(VE-cad)試劑盒艾納香素 B二乙二丁  99% CP，99.0%（劇品）

血管內(nèi)皮鈣粘著蛋白復(fù)合體(VE-cad)試劑盒桉樹腦二乙二丁 CP GR,99.8%

α平滑肌肌動(dòng)蛋白(α-SMA)試劑盒 桉樹素1,3-丁二 99% 99.995%

α平滑肌肌動(dòng)蛋白(α-SMA)試劑盒 烯1,3-丁二 分析標(biāo)準(zhǔn)品玫瑰紅 Indicator

α橫紋肌肌動(dòng)蛋白(α-SCA)試劑盒桉脂素1,3-丁二 98%過氧化鈉 95%

α橫紋肌肌動(dòng)蛋白(α-SCA)試劑盒奧多諾甙 H三硅烷 Wacker quality, ≥99.0% (GC)高鈉 ACS, 99.8-100.3%

平滑肌肌球蛋白(SMM)試劑盒 奧洛波爾二  ≥99.0%(GC)亞硝鈷鈉 AR,Co 13.5～14.5%

平滑肌肌球蛋白(SMM)試劑盒 奧沙京正十二硫 98%偏鋁鈉 AR
FBN1原纖維蛋白-1ELISA試劑盒DAPI（4,6-Diamidino-2-phenylindole ，4,6-二氨基-2-苯基吲哚）是一種DNA 特異性染料，與DNA產(chǎn)生非嵌入式結(jié)合，發(fā)出藍(lán)色熒光。該染料對(duì)細(xì)胞膜有半通透性，可透過正常活細(xì)胞產(chǎn)生較弱的藍(lán)色熒光（細(xì)胞固定后熒光增強(qiáng)），而凋亡細(xì)胞的膜通透性增加，對(duì)其攝取能力增強(qiáng)，產(chǎn)生很強(qiáng)藍(lán)光染色。

正常細(xì)胞的核形態(tài)呈圓形，邊緣清晰，染色均勻，而凋亡細(xì)胞的細(xì)胞核邊緣不規(guī)則，細(xì)胞核染色體濃集，著色較重，并伴有細(xì)胞核固縮，核小體碎片增加，因此從熒光強(qiáng)度及核形態(tài)均可鑒別出細(xì)胞發(fā)生凋亡的典型特征。

操作方法（本方法針對(duì)貼壁細(xì)胞，但不僅限于貼壁細(xì)胞）

1. 貼壁培養(yǎng)的細(xì)胞爬片棄去培養(yǎng)基，10mM PBS，pH7.4，洗一次；

2. 再滴加入100μL 的DAPI 染液，室溫避光染色5-15 min；

3. 棄去染色液，PBS 漂洗一次，

4. 滴加甘油或Buffer A，熒光顯微鏡以340/380nm 紫外光激發(fā)，500×（40×12.5）（好是100×油鏡頭）觀察、拍照。

儲(chǔ)存：2-8℃，避光，有效期6個(gè)月。